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케라티나제의 물리화학적 성질

지금까지 분리, 정제된 케라티나제의 분자량은 10kDa 이상부터 수백 kDa까지 매우 다양하다. 작은 것은 단위체 효소로 Nesternkonia spAL-20의 분자량은 18kDa인 것으로 보고되어 있습니다. 예를 들어, 호열성 혐기성 세균이 생산하는 케라티나제는 200kDa 이상에 달할 수 있습니다. 대부분의 케라티나제의 분자량은 30~70kDa에 집중되어 있는데, 예를 들어 HSIN-HUNG LIN이 보고한 Pseudomonas aeruginosa가 생산하는 케라티나제의 크기는 30kDa이고, Xanthomonas maltophilia가 생산하는 케라티나제의 크기는 30kDa이다. 36kDa, 칸디다파랍실증은 60kDa입니다. Bacillus subtilis가 생산하는 케라티나제의 분자량은 60kDa입니다. 케라티나제의 최적 반응 pH는 대부분 중성~알칼리성이며 일반적으로 7~10 사이입니다. 개별 케라티나제의 최적 pH는 약 12에 도달할 수 있습니다. 산성 케라티나제는 상대적으로 적으며, 대부분은 특정 곰팡이에 의해 생성됩니다. 예를 들어 Trichomonas mentagrophysalis가 생성하는 케라티나제의 최적 pH는 5.5이고 Candida albicans의 최적 pH는 4.0입니다.

케라티나제의 최적 반응 온도는 일반적으로 40℃에서 60℃ 사이입니다. 예를 들어 Microbacterium의 최적 온도는 55℃입니다. D1은 20℃인 반면, Fervidobacterium islandicum AW-1의 막 결합 케라티나제의 최적 온도는 100℃에 달합니다. 케라틴은 물과 대부분의 유기용매에 불용성이므로 일반 프로테아제보다 케라티나제 활성 측정이 더 어렵습니다. 케라티나제를 측정하기 위해 일반적으로 사용되는 원리는 기질의 가수분해 후 방출되는 아미노산의 양을 기준으로 케라티나제의 활성을 결정하는 것입니다. 현재 케라티나제를 측정하는 세 가지 주요 방법이 있는데, 그 중 하나는 케라틴 분말을 측정용 기질로 직접 사용하는 것입니다. Tu Guoquan 등(1998)은 깃털 분말을 케라티나제 측정용 기질로 사용했습니다. 두 번째 방법은 변형된 기질을 사용하여 효소활성을 측정하는 방법으로, 기질로 사용된 케라틴이 발색기에 연결되어 있는 것을 이용하여 효소의 활성을 판단할 수 있다. 기질이 가수분해됩니다. 두 가지 대표적인 기질은 azokeratin[62]과 azure keratin[63]이며, 전자는 azo를 깃털 케라틴의 유리 아미노산 잔기에 연결하고, 후자는 양모 케라틴과 트리메틸메타크릴레이트를 결합한 생성물입니다. 세 번째 방법은 수용성 깃털 케라틴을 기질로 사용하여 케라티나제의 활성을 특성화하는 방법입니다. 이 방법은 Wawrzkiewicz에 의해 제안되었으며 널리 사용됩니다. 디메틸설폭사이드를 사용하여 깃털 케라틴을 용해시킨 후, 이소프로필알코올로 침전시켜 건조된 가용성 케라틴을 해당 완충액에 기질로 용해시킵니다.

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