이 질문에 대한 답변은 무한신계몽생명공학에서 해드립니다.
ELISA 실험을 할 때는 검체 채취 시 주의사항을 먼저 이해하고 처리해야 합니다.
검체 채취 시 주의사항
1. 혈액 채취에 사용되는 시험관은 무발열성, 무내독소 시험관이어야 합니다.
2. 혈청 및 혈장에는 용혈된 검체와 고지혈증 검체를 사용하지 마십시오.
3. 검체는 맑고 투명해야 하며, 원심분리를 통해 부유물질을 제거해야 합니다.
4. 검체 채취 후 제때 검사를 하지 않은 경우에는 1회 사용량에 맞게 포장하여 반복 냉동을 방지하기 위해 -20°C 또는 -80°C 냉장고에 냉동 보관해야 합니다. 그리고 해동.
5. 검체의 실제 상황에 따라 적절한 배수 희석이 가능합니다. (희석 배수를 결정하기 위해 사전 실험을 수행하는 것이 좋습니다).
6. 실험을 반복할 때 실험이 실패하고 표본이 누락되어 실험 과정이 지연되는 것을 방지하기 위해 표본을 수집하고 중복된 양을 사용하도록 노력하십시오.
7. 검체 채취 시 모든 검체는 위험할 수 있으므로 보호 조치(장갑, 마스크, 고글 등 착용)를 취해야 합니다.
8. 검체 처리는 생물안전작업대에서 이루어져야 하며, 생물안전작업대를 올바르게 사용해야 합니다.
올바른 검체 처리 방법은 다음과 같습니다.
검체 처리 방법
1. 혈청: 채취한 전혈을 4°C의 냉장고에 보관합니다. 하룻밤 동안 1000~3000rpm으로 원심분리한 후 상등액을 채취하여 즉시 시험한다. 일시적인 경우에는 -20℃(1~3개월) 또는 -80℃(3~6개월)에서 보관할 수 있다. .
2. 혈장 : 항응고제로 EDTA, 구연산나트륨, 헤파린 등을 사용하고 혈액을 넣어 균일하게 섞은 후 1000~3000rpm으로 10분간 원심분리한 후 상청액을 즉시 채취한다. -20℃(1~3개월) 또는 -80℃(3~6개월)에서 보관
3. 조직 균질화: 조직 조각을 자르고 0.01MPBS에 한 번 세척합니다. 1G 조직 비율에 따라 조직 단백질 추출 시약 5-10ml를 첨가하고 얼음물에 균질화합니다. 균질화가 완료된 후 5000~10000rpm으로 10분간 원심분리한 후 상등액을 채취하여 즉시 시험한다. 일시적인 부득이한 경우에는 -20℃(1~3개월) 또는 -80℃(3개월)에 보관할 수 있다. -6개월).
4. 세포배양상등액 : 1000~3000rpm으로 10분간 원심분리하여 상층액을 채취하여 즉시 시험한다. 일시적인 이상이 있을 경우에는 -20℃에 놓아두어도 된다(1~3개월). 또는 -80℃(3~6개월)로 저장하세요.
5. 소변, 복수, 뇌척수액 등 : 1000~3000rpm으로 10분간 원심분리하여 상등액을 채취하여 즉시 검사할 경우에는 -20℃에 놓아두어도 된다. 1~3개월) 또는 -80℃3~6개월) 보존.
참고: 시료 희석의 일반 원칙
사용자는 관련 문헌을 참조하여 시료에서 측정할 인자의 내용을 이해하고 적절한 희석 인자를 결정하여 인자가 희석된 시료에서 측정할 농도가 ELISA 키트의 최적 검출 범위 내에 있습니다. 시료의 희석을 자세히 기록해야 합니다.
제가 도움이 되기를 바라며 과학 연구의 성공을 기원합니다!