카탈라아제 측정을 위한 일반적인 단계는 다음과 같습니다.
1. 시료 준비: 테스트할 시료를 적절한 농도와 양으로 준비합니다.
2. 시약 준비: 과산화수소가 포함된 시약(보통 과산화수소 용액)을 준비합니다.
3. 효소 첨가 : 과산화수소 분해를 촉매할 수 있도록 검사할 시료에 카탈라아제를 첨가합니다.
4. 반응 시간: 일정 시간(보통 실온에서 몇 분) 내에 샘플과 시약을 반응시킵니다.
5. 반응 중지: 일반적으로 산이나 염기 등의 반응 중지 시약을 첨가하여 효소 활동을 중지합니다.
6. 측정 결과: 카탈라제 활성을 측정하기 위해 반응에 의해 생성된 생성물의 농도를 측정하기 위해 비색법이나 형광과 같은 특정 분석 방법을 사용합니다.
카탈라아제 활성을 측정하는 방법은 과산화수소를 촉매해 산소를 생성할 수 있는 카탈라아제(PHD)의 특성을 바탕으로 요오드측정법과 전극법이 많이 사용된다.
전자는 PHD가 H2O2 반응을 촉매한 후 남은 H2O2와 요오드화물의 반응으로 생성되는 요오드 양의 변화를 측정하여 PHD 활성을 계산합니다. 이 방법의 장비는 간단하지만 조작이 복잡하고 오차가 크다.
후자의 원리는 H2O2가 전기활성물질이지만, PHD 촉매작용 후의 생성물은 전기활성물질인 백금전극을 사용하여 전류변화 전후의 전압변화를 측정하는 것이다. PHD 촉매작용 및 PHD가 활성 크기를 측정합니다. 분광광도법, Valsalva 호흡계 압력 검출법, 황산세륨법 등도 적용할 수 있습니다.